原代T细胞，使用CRISPR基因敲入优化试剂盒，敲入GFP或eGFP序列，TRAC位点敲入效率高达54%
原代T细胞，使用CRISPR基因敲入优化试剂盒，敲入GFP或eGFP序列，RAB11a位点敲入效率高达57%%
* 欢迎咨询基因敲入增强剂（Enhancer），您可以联系技术支持了解详情或订购，邮箱： oligo@genscript.com.cn ，电话：400-025-8686转5812或5815。
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
|---|---|---|---|
| KIOK1 | SafeEdit TRAC sgRNA | 3 nmol | 680 |
| KIOK2 | SafeEdit Rab11a sgRNA | 3 nmol | 680 |
| KIOK3 | Ultra eSpCas9 | 200 μg | 2600 |
| KIOK4 | Ultra WTSpCas9 | 200 μg | 2150 |
| KIOK5 | ssDNA_TRAC_EGFP | 50 μg | 6800 |
| KIOK6 | ssDNA_TRAC_EGFP_CTS | 50 μg | 6800 |
| KIOK7 | dsDNA_TRAC_EGFP | 50 μg | 3300 |
| KIOK8 | dsDNA_TRAC_EGFP_CTS | 50 μg | 3300 |
| KIOK9 | ssDNA_RAB11A_GFP | 50 μg | 6200 |
| KIOK10 | ssDNA_RAB11A_GFP_CTS | 50 μg | 6200 |
| KIOK11 | dsDNA_RAB11A_GFP | 50 μg | 3000 |
| KIOK12 | dsDNA_RAB11A_GFP_CTS | 50 μg | 3000 |
| KIOK13 | TRAC CTS Annealing Oligo | 2 nmol | 60 |
| KIOK14 | RAB11A CTS Annealing Oligo | 2 nmol | 60 |
| KIOK15-1 | 基因敲入增强剂（Enhancer） | 30 μL | 760 |
| KIOK15-2 | 基因敲入增强剂（Enhancer） | 150 μL | 2350 |
备注：
如您选购KIOK6 ssDNA_TRAC_EGFP_CTS，则需要同时选购KIOK13 TRAC CTS Annealing Oligo来配合进行实验。
如您选购KIOK10 ssDNA_RAB11A_GFP_CTS，则需要同时选购KIOK14 RAB11A CTS Annealing Oligo来配合进行实验。
1. 请选择您需要的目的基因敲入位点:
2. 请选择您需要的基因敲入模板：
3. 请选择您需要的基因敲入模板：
4. 您是否需要在您的基因敲入模板上增加CTS序列去提升敲入效率？
(CTS设计提升编辑效率的方案详见文献报告和案例分享
，实验操作详见操作指南)
请查收您的定制化试剂盒，按照《金斯瑞的实验操作指南》的推荐试剂剂量，可以用于约12个反应的实验（Lonza 4D电转平台），或用于25个反应的实验（Neon电转平台），您可以根据您的实验体系和试剂用量增减产品数量，确保每个组分的交付量足够支持您开展实验。
| 货号 | 产品名称 | 数量 |
|---|---|---|
|
KIOK1-1.5
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 1.5 nmol | |
|
KIOK1-3
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 3 nmol | |
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KIOK1-6
|
SafeEdit TRAC sgRNA - 6 nmol | |
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KIOK2-1.5
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SafeEdit RAB11A sgRNA - 1.5 nmol | |
|
KIOK2-3
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 3 nmol | |
|
KIOK2-6
|
SafeEdit RAB11A sgRNA - 6 nmol | |
|
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
|
KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK4-200
|
Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK4-400
|
Ultra WTSpCas9 - 400 μg | |
|
KIOK5
|
ssDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
|
KIOK6
|
ssDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK7
|
dsDNA_TRAC_EGFP - 50 μg | |
|
KIOK8
|
dsDNA_TRAC_EGFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK9
|
ssDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
|
KIOK10
|
ssDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK11
|
dsDNA_RAB11A_GFP - 50 μg | |
|
KIOK12
|
dsDNA_RAB11A_GFP_CTS - 50 μg | |
|
KIOK13
|
TRAC CTS Annealing Oligo - 2 nmol | |
|
KIOK14
|
RAB11A CTS Annealing Oligo - 2 nmol |
备注：ssDNA选择含CTS模板必须配套使用对应位点的退火引物，dsDNA本身即为双链无需退火
您可以根据实际需求选择加购以下产品：
| 货号 | 产品名称 | 数量 |
|---|---|---|
|
KIOK3-100
|
Ultra eSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK3-200
|
Ultra eSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK3-400
|
Ultra eSpCas9 - 400 μg | |
|
KIOK4-100
|
Ultra WTSpCas9 - 100 μg | |
|
KIOK4-200
|
Ultra WTSpCas9 - 200 μg | |
|
KIOK4-400
|
Ultra WTSpCas9 - 400 μg |
参考文献
原代T细胞，使用CRISPR基因敲入优化试剂盒，敲入GFP或eGFP序列，TRAC位点敲入效率高达54%
原代T细胞，使用CRISPR基因敲入优化试剂盒，敲入GFP或eGFP序列，RAB11a位点敲入效率高达57%%
在不同细胞敲入GFP序列的实验中添加增强剂（Enhancer）后，iPSC细胞敲入效率提升至高达2倍，T细胞敲入效率提升至高达2.4倍
应用
细胞治疗、KI细胞系/动物模型构建
优势
规格
应用
长基因敲入、工艺放大/规模量产
优势
规格
应用
替代传统质粒HDR模板，匹配申报合规性
特点
规格
UCSF Marson Lab 开发了一种含CTS设计的敲入模板，在两端添加了Cas9蛋白靶向序列（CTS），两端序列中互补的序列通过退火形成了双链DNA。整个HDR模板中，待插入基因左右两侧为同源臂序列，同源臂序列外端为CTS序列，CTS包含PAM序列、gRNA序列和一段边缘核苷酸序列。
通过这种设计，CTS可以让RNP（Cas9+sgRNA）与敲入模板整合在一起进行电转，促进其进入宿主细胞的细胞核，这种设计可以让基因敲入模板更接近RNP的切割位点，从而提升目标基因插入效率。通过添加CTS设计，GMP适用规模的GenExact™ ssDNA 在未添加增强剂的条件下，敲入效率可高达46.2%（图3）。
