金斯瑞小核酸药开发服务 | siRNA/ASO设计、合成、递送、筛选

咨询/订购在线咨询

概览服务内容案例分享联系我们

首页 » 引物合成服务 » 小核酸药物开发服务

概览

小核酸药（siRNA、ASO等）开发项目涉及多个环节，金斯瑞提供涵盖设计、合成、递送、筛选和生物分析检测4大环节的小核酸药开发服务，帮助您一站式的完成小核酸药候选化合物的发现工作。

服务优势

一站式服务，更高效

AI设计、合成、递送、筛选，
RUO至GMP级别，高达kg级别

优化的AI序列设计，更精准

根据实验结果优化设计逻辑，
实验验证沉默效率高达98%

多元化方案，更灵活

全流程服务或单个服务可选，多种套餐，支持定制化需求

经验丰富，更快交付

22年+寡核苷酸合成经验，
全球多个筛选项目交付经验

核酸服务

服务流程

STEP 1
AI序列设计（3天起）

根据目标基因设计siRNA或ASO序列，可预测修饰siRNA沉默效率

优势：

根据实验结果优化设计逻辑，经验证基因沉默效率更高
跨物种的设计策略，支持临床前动物实验和临床试验的序列需求
支持定制化的设计需求

STEP 2
序列合成（4天起）

nmol~mol级别 siRNA / ASO，科研至GMP级别，支持高通量合成

优势：

默认HPLC纯化，MS/HPLC检测，纯度≥90%，批次间稳定
支持多种定制化修饰、QC
提供自研修饰，提升稳定性，降低脱靶效应

STEP 3
递送方案（2周起）

siRNA/ASO与抗体/多肽/脂质偶联，GalNAc修饰，LNP包装

优势：

自研的定点偶联技术，实现靶向递送，支持多种核酸抗体比例（DAR值）
肝、肺、脾脏、T细胞等多种靶向LNP

STEP 4
筛选与生物分析检测（2周起）

检测mRNA或蛋白水平沉默效率、稳定性、脱靶效应、免疫原性、细胞毒性等

优势：

可开展高通量筛选，IC₅₀检测，多种实验方案可选，结果稳定，重复性好
根据目标基因优化检测方案，更精准

案例分享

AI设计平台： 沉默效率更高，助力发现沉默效率≥90%的候选分子
- 针对4组基因，金斯瑞设计的序列均可以达到沉默效率≥90%，更有价值用于后续开发
- 金斯瑞设计的siRNA经实验验证沉默效率可高达98%，且优于其他平台设计siRNA
针对不同位点，siRNA在不同浓度条件下mRNA水平的敲降效率。（1）TTR、NRAS和PCSK9位点：用RNAiMAX在HepG2（TTR&PCSK9）和A549（NRAS）细胞上分别转染对应位点的siRNA，转染浓度为10nM和0.1nM，转染48h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率；（2）EGFR位点：用电转的方式在H1975细胞上转染EGFR位点的siRNA，siRNA量为15pmol和1.5pmol，电转48h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率。
合成平台： 纯度高，分子量准确，批次间一致性好
递送平台：定点偶联、GalNAc修饰、LNP包封，支持靶向递送
定点偶联递送技术
- 高效的定点偶联技术实现siRNA和抗体的偶联（ARC, Antibody RNA Conjugation）不仅可以保证显著的基因沉默效率，还可以实现靶向递送。
- 表达抗体受体蛋白的细胞可以观察到50%的基因沉默效率 ( 左图 )，不表达抗体受体蛋白的细胞未见基因沉默效率 ( 右图 )。
针对X基因，ARC在不同浓度条件下mRNA水平的敲降效率。在positive cell line和negative cell line上孵育X基因的ARC以及对应的siRNA，孵育浓度分别为3nM、10nM、30nM、100nM、300nM，孵育72h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率。

定点偶联递送技术
- 使用LNP包封siRNA，基因沉默效率可高达96%
- 可提供肝、肺、脾脏、T细胞等多种靶向LNP，查看验证数据
实验结果：使用LNP包封siRNA，基因沉默效率可高达96%。

针对X基因，LNP包裹的siRNA在不同浓度条件下mRNA水平的敲降效率。在H1975细胞系上孵育LNP-target gene siRNA以及对应的LNP-scramble siRNA，孵育浓度分别为10nM、30nM、50nM、100nM、300nM，同时用RNAiMAX转染10nM target gene siRNA作为阳性对照，转染48h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率。
筛选平台：高通量筛选，获得更高沉默效率的候选分子
基于金斯瑞优化的AI设计能力和稳定的筛选平台，设计的50组siRNA中:
- 基因沉默可高达91%，13组siRNA沉默效率高于阳性对照（PC）
- 筛选平台成熟，工艺稳定，实验重现性更好
针对B基因，50条siRNA在人前列腺癌细胞系中mRNA水平的敲降效率。用RNAiMAX在人前列腺癌细胞系中转染50条siRNA，转染浓度为1nM，转染48h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率。

基于金斯瑞优化的AI设计能力和稳定的筛选平台，设计的150组ASO中:
- 9组基因沉默可高于90%，19组沉默效率高于阳性对照（PC）
- 筛选平台成熟，工艺稳定，实验重现性更好
针对X基因，150条ASO在Hep3B细胞系中mRNA水平的敲降效率。用RNAiMAX在Hep3B细胞系中转染150条ASO，转染浓度为30nM，转染48h后提取细胞RNA、反转录，qPCR检测mRNA水平的敲降效率。
筛选平台：多种方案检测蛋白表达量，验证siRNA活性

ELISA

应用：分泌蛋白的定量

优势：支持定性和定量，可使用酶标仪检测

用ELISA的方法检测X基因15条siRNA在HepG2细胞系中蛋白水平的敲降效率。用RNAiMAX在HepG2细胞系中转染15条siRNA，转染浓度为10nM，转染48h后收集细胞上清液，用ELISA试剂盒检测目的基因蛋白水平的敲降效率。

免疫荧光染色

应用：膜蛋白的定量

优势：支持定性和定量，可使用流式细胞仪检测

在H1975细胞系中用免疫荧光染色的方法检测X基因5条siRNA在不同浓度条件下蛋白水平的敲降效率。用RNAiMAX在H1975细胞系中转染5条siRNA，转染浓度分别为10nM、1nM、0.1nM，转染48h后用对应抗体染色，然后用流式检测目的基因蛋白水平的敲降效率。

Western blot

应用：多种蛋白的定量

优势：支持定性和半定量，可使用凝胶电泳检测

在人前列腺癌细胞系中用WB的方法检测A基因和B基因siRNA在不同浓度条件下蛋白水平的敲降效率。用RNAiMAX在人前列腺癌细胞系中转染A基因和B基因的siRNA，转染浓度分别为10nM、1nM、0.1nM，转染72h后用RIPA裂解液裂解细胞，获取蛋白，然后用WB的方法检测目的基因蛋白水平的敲降效率。