自扩增RNA合成服务

更低RNA剂量，更高蛋白表达量
经筛选与验证的复制酶元件与修饰，质量稳定

新技术助攻mRNA疫苗与疗法实现突破

自扩增RNA（也称为自复制RNA，saRNA）是一种可以在细胞内编码复制酶，并复制原始RNA链的mRNA。它具备多种与传统mRNA类似的结构，例如它是线性结构的单链RNA分子，具有5'加帽、3'加尾、 5'和3'非翻译区（UTRs）。但不同于传统mRNA，基于自扩增RNA自我复制的特性，其可以实现更小的给药剂量，更低的副作用，更长的表达时间。

金斯瑞提供定制化合成的自扩增RNA和现货自扩增RNA产品，具备优化的设计和修饰，从而保证mRNA的质量和下游蛋白表达量，加速您创新项目的进程。

IVT mRNA合成服务

金斯瑞自扩增RNA的优势

经筛选与验证的复制酶元件与修饰

整合固定元件的即用模板，加速交付
质量稳定，蛋白表达量更高

增强与延长的蛋白表达能力

更少量的mRNA即可实现更强更持久的蛋白表达
支持mRNA应用降本增效

多种载体支持多元化应用

不同免疫原性的载体可选
精准匹配不同下游应用

自扩增RNA的表达机制

不同类型mRNA的比较

	线性mRNA	自扩增RNA	环状RNA
示意图
结构	线性，开放5'和3'端，易被核酸外切酶降解	线性，开放5'和3'端，易被核酸外切酶降解	闭环结构，无开放的5'端和3'端不易被核酸外切酶降解
核糖体招募	5'Cap: 启动翻译，使mRNA更稳定	5'Cap: 启动翻译，使mRNA更稳定	核糖体进入位点 (IRES): 启动翻译
ORF	可进行密码子优化提升蛋白表达量可进行碱基修饰，例如M1Ψ 目标序列长度＜20kb	可进行密码子优化提升蛋白表达量可进行碱基修饰，例如m5C 目标序列长度＜6kb	可进行密码子优化提升蛋白表达量目标序列长度＜4kb
UTR	5'端和3'端的UTR结构提升mRNA的稳定性，促进mRNA翻译	5'端和3'端的UTR结构提升mRNA的稳定性，复制酶促进mRNA的自我复制	包含IRES+PIE+其他元件
PolyA尾	提升mRNA的稳定性，避免mRNA降解	提升mRNA的稳定性，避免mRNA降解	不需要
蛋白表达量	强+++	强+++++	强++++
蛋白表达半衰期	短	更长	长
免疫原性	低	高	中等
所需剂量	高	低	中等
创新性	传统	新	更新

服务流程

密码子/UTR优化

每个基因都会进行密码子优化，保证蛋白表达量
金斯瑞创新的密码子优化，结合＞200种影响因子进行优化

基因合成

支持100bp至6 kb目标序列合成
基因合成周期快至6-14个工作日
专用的基因合成Poly(A)的载体

克隆/质粒制备

即用型线性化质粒，支持体外mRNA转录
载体含稳定的Poly(A)结构，长度均一，误差不超过±5-10nt

saRNA合成

定制化RUO级别saRNA制备
先进的纯化技术，多种QC可选

LNP递送

通用可电离脂质制剂
可荷载1-30mg saRNA

服务详情

定制化saRNA合成服务

服务名称	目标序列长度	交付量*	纯化方式^&	载体#	修饰	溶剂	QC	saRNA 制备周期
自扩增RNA	100bp - 6kb	100μg至200mg	LiCl	GS-saRNA-1 GS-saRNA-3 GS-saRNA-4	m5C或不修饰	Sodium citrate, pH6.5 (默认0.5-2mg/ml)	研究级-标准研究级-升级	快至2周

* 单批次交付量，总体交付量高达g级别
& 纯化方式可升级为HPLC纯化
# 不同载体匹配不同应用

载体名称	加帽类型	推荐修饰	体外表达			体内靶向性（基于SM102-LNP配方）
载体名称	加帽类型	推荐修饰	HEK293T	A549	Jurkat	体内靶向性（基于SM102-LNP配方）
GS-saRNA-1	Cap-AU	m5C	++++	+++	+++	脾脏、心脏
GS-saRNA-3	Cap-AU	m5C或不修饰	+++++	+++	+	脾脏
GS-saRNA-4	Cap-AU	m5C或不修饰	++++	+++	+++	脾脏

GS-saRNA-1：在多种细胞系中表现出高表达水平，并且具有广泛的体内表达分布。可作为常规推荐的载体，可能适用于免疫应用和蛋白替代疗法。
GS-saRNA-3：在普通细胞系中表现出非常高的表达水平，但在免疫细胞系中的表达较低。如果希望在普通细胞系中提高目标基因的表达水平，可以选择该载体。
GS-saRNA-4：其体外表达水平与GS-saRNA-1相似，但在体内表达分布上有所不同。主要在脾脏中表达，可能更适用于免疫疗法应用，例如疫苗或体内CAR疗法等。

自扩增RNA现货产品，即刻订购！

eGFP自扩增RNA、F-Luc自扩增RNA现已上线，支持在线订购，快至当天发货！
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QC详情

QC	项目	检测方式	检测标准
鉴定	外观	视觉观测	澄清无异物
	RNA长度	毛细管电泳 (CE)	目标长度±30%
	RNA长度	琼脂糖凝胶电泳	检测到目标大小的条带
	Poly(A)长度	酶切法和CE	目标长度±30%
	RNA含量	紫外吸收	目标含量±5%
	pH	pH计	目标值±0.5
	缓冲液规格	按客户提供详情	N/A
纯度	A260/280	UV检测	1.70 ~ 2.30
	加帽效率	LC-MS	≥ 90%
	纯度	毛细管电泳 (CE)	≥ 70%
杂质	内毒素	半定量	< 10 EU/mg

案例分享

较之常规自扩增RNA，金斯瑞自扩增RNA具有更高的蛋白表达量

实验结果：金斯瑞saRNA基于GS-saRNA-1载体合成，m5C修饰，具有不同的经过筛选验证的复制酶元件和修饰，与常规saRNA 比较，金斯瑞设计的GS-saRNA 具有更高的初始及持续蛋白表达量，表达量可以高达10倍。
使用LNP递送自扩增RNA，在HEK293T细胞中蛋白表达量更高

10 ng 的 EGFP saRNA 通过 LNP (SM102) 或 Lipofectamine™ MessengerMAX™ (Thermo) 转染到 HEK293T 细胞中。转染后 48 小时，通过荧光显微镜检测并成像 EGFP 信号，使用 Image J 软件对信号强度进行定量分析。
金斯瑞自扩增RNA在更低剂量下的表达水平与普通线性 mRNA 或环状 RNA 相当，甚至更高

EGFP mRNA、circRNA 或 saRNA 通过 LNP（SM102）转染至 HEK293T、A549 或 Jurkat 细胞中。在转染后 24、48 和 72 小时，通过荧光显微镜检测 EGFP 信号，并使用 ImageJ 软件进行定量分析。在转染后48h，免疫原性相关的细胞因子通过ELISA方法进行评估。
在A549细胞中，自扩增RNA相比普通mRNA或环状RNA显示出更长的半衰期

在A549细胞中，用LNP（SM102）转染100ng EGFP mRNA、环状RNA或saRNA（saRNA-1）。通过RT-qPCR检测EGFP的RNA水平，评估普通线性mRNA和saRNA的半衰期。
金斯瑞自扩增RNA在小鼠体内的表达：SaRNA在体内的表达时间较长；未观察到显著毒性

SM102包裹的Fluc mRNA或saRNA通过静脉注射进入小鼠，剂量为0.25 mg/kg，每组3只小鼠。注射24小时后，小鼠通过腹腔注射100 μL的30 mg/mL D-荧光素。使用体内成像系统对小鼠进行成像，观察小鼠不同时间点的总荧光强度。
金斯瑞自扩增RNA在小鼠体内的表达：与mRNA不同，mRNA主要在肝脏中表达，而saRNA表现出肝外表达

SM102-DiR标记的Fluc mRNA或saRNA通过静脉注射进入小鼠，剂量为0.25 mg/kg，每组3只小鼠。注射24小时后，小鼠通过腹腔注射100 μL的30 mg/mL D-荧光素。使用体内成像系统对小鼠进行活体成像，观察小鼠体内的总荧光分布。在此之后，小鼠被处死，成像并定量分析了脑、心脏、肺、肝、肾、淋巴结和脾的荧光分布。