杆状病毒-昆虫表达系统

• 过表达的多次跨膜蛋白通常具有细胞毒性，因此即使重组表达的多次跨膜蛋白的表达量也远低于可溶性蛋白且纯化难度较大。
• 金斯瑞针对跨膜蛋白特点，对病毒构建、细胞培养和纯化等工艺进行优化并筛选合适的去垢剂或脂分子使蛋白保持其空间构象和活性，从而获得高纯度的具有天然构象和活性的多次跨膜蛋白。
• 2020年起，已对200余例不同跨膜次数的蛋白进行纯化表达，成功率高达85%。

CLDN 18.2 作为Claudins蛋白家族的成员之一，是一类存在于上皮和内皮紧密连接处的四次跨膜蛋白，是多类肿瘤的重要作用靶点。昆虫-杆状病毒系统中成功表达CLDN 18.2四次跨膜蛋白，纯度90%，表达量3mg/L。

血凝素(Hemagglutinin)是一种存在于病毒表面的蛋白质，具有具有免疫原性，在病毒导入宿主细胞的过程中扮演重要角色，自然状态下以三聚体的形式存在于双层类脂膜上，有一个跨膜域。昆虫-杆状病毒系统中成功表达流感病毒的血凝素一次跨膜蛋白，纯度85%，表达量2.2mg/L

• 一些大分子量蛋白，例如膜蛋白，属于非可溶性蛋白，且表达量通常较低，所以要选择合适的方法来进行蛋白的表达纯化和富集，且需要选择合适的细胞系。
• 因分子量大，一般采用可以容纳大分子片段插入的经典的昆虫-杆状病毒表达体系，并选择分泌蛋白表达量较高的Hi5细胞进行培养。

Hi5细胞成功表达大分子量蛋白（100kDa），纯度95%，表达量10mg/L。

• Sf9细胞系是传统的用于杆状病毒表达的细胞系，属于半贴壁型细胞系，在蛋白的表达纯化中具备许多优点，如表达的重组蛋白能正确折叠并形成二硫键；对蛋白进行翻译后修饰加工，使重组蛋白在结构和功能上更贴近天然蛋白；可容纳大片段外源基因等。

Sf9细胞成功表达Kinase，纯度95%，表达量10mg/L

• 昆虫-杆状病毒表达系统主要优势：1.外源基因在昆虫细胞内能进行正确折叠，表达出的目的蛋白在结构和功能上均更接近天然蛋白；2.昆虫细胞能对翻译后蛋白进行磷酸化、糖基化、酰基化及肽段的切割和分解等加工修饰；3.该表达系统具备在同一细胞内同时表达多个基因的能力，能容纳大分子的插入片段，表达产物可加工形成具有活性的异源二聚体或多聚体。
• 金斯瑞昆虫-杆状病毒蛋白表达系统可提供多种类的蛋白表达并根据Sf9、 Sf21、 Hi5及其它昆虫细胞系的密码子偏好性，免费为您进行密码子优化，有效提高蛋白表达量。

• 昆虫-杆状病毒系统中成功表达Virus蛋白，纯度90%，表达量30mg/L

  

• 昆虫-杆状病毒系统中成功表达多亚基复合物蛋白