环状RNA合成服务

金斯瑞环状RNA的优势

设计灵活，规格多样

• 定制化设计：适用于蛋白编码和非编码应用。多种IRES可选、支持客户自定义IRES序列。
• 规格多样：从100 μg到20 mg，满足各类项目需求。

高效环化，纯度高

• 环化效率高：创新的环状RNA载体和环化技术。
• 纯化水平高：专有的HPLC纯化方法，确保≥80%纯度。

一站式服务，交付快

• 涵盖基因合成、质粒抽提、环状RNA制备，快至三周交付。
• 可衔接LNP包封服务，支持下游应用开发。了解更多>>

定制化环状RNA 合成流程：从设计到交付

QC详情

案例分享

• 环状RNA较之线性mRNA，稳定性高、降解慢、蛋白表达量高

  通过RT-PCR检测mRNA拷贝数

  

  通过荧光强度检测mRNA蛋白表达量

  

  实验方法：

  将编码GFP的环状RNA（无修饰）和线性mRNA（100% N1-me-pseU修饰）以同等的mol剂量转染A549细胞，用qPCR检测编码mRNA的丰度，用流式细胞术检测GFP蛋白的荧光强度。

  实验结论：72小时后

  • 环状RNA的拷贝数是线性mRNA的4倍，稳定性好，降解慢
  • 环状RNA的蛋白表达量是线性mRNA的3倍，表达时间长，表达量高
• 金斯瑞环状RNA较之常规环状RNA，蛋白表达量更高
  

  实验方法：

  比较线性mRNA，常规环状RNA*，金斯瑞环状RNA（自研技术）三种编码eGFP的mRNA，转染A549细胞后蛋白表达量。

  * Wesselhoeft, R.A., Kowalski, P.S. & Anderson, D.G. Engineering circular RNA for potent and stable translation in eukaryotic cells. Nat Commun 9, 2629 (2018)

  实验结果：

  金斯瑞环状RNA在开始的蛋白表达量和积累的蛋白表达量上，都有更高的表达水平。

• 金斯瑞环状RNA在多个细胞模型上蛋白表达量更高
  

  实验方法：

  比较常规环状RNA*，金斯瑞环状RNA（自研技术）两种编码eGFP的mRNA，转染A549细胞和HEK293T细胞后，通过流式细胞术检测蛋白表达量。

  * Wesselhoeft, R.A., Kowalski, P.S. & Anderson, D.G. Engineering circular RNA for potent and stable translation in eukaryotic cells. Nat Commun 9, 2629 (2018)

  实验结果：

  基于自研技术的金斯瑞环状RNA，在经过HPLC纯化后，在两个细胞上的蛋白表达量均高于常规环状RNA 2-4倍。

• 环状RNA较之线性mRNA，免疫原性更低
  

  实验方法：

  将不同mRNA转染A549细胞(InvivoGen)，IL6水平检测：Abcam Human IL-6 ELISA Kit，IFN-α水平检测：QUANTI-Luc/Gaussia kit，NF-Kb水平检测：QUANTI-Blue kit。

  实验结果：

  较之线性mRNA，环状RNA引起的细胞因子上升幅度更低，免疫原性更低。

• 无痕环状RNA 相较于线性 mRNA 和经典有痕环状RNA，蛋白表达量更高、更持久
  

  

  实验方法：

  不同 RNA 形式（线性 mRNA、有痕环状RNA和无痕环状RNA）在不同细胞系中的翻译效率与稳定性比较：HEK293T（人胚胎肾细胞系）及Jurkat（人T淋巴细胞白血病细胞系）。

  实验结论：

  与有痕环状RNA相比，无痕环状RNA 表达效果更优。在 6 天后仍保持较高水平，明显优于有痕环状RNA和线性 mRNA。

常见问题

• 不同环状RNA 解决方案的应用场景是什么？
  • PIE法构建的有痕环状RNA适用于编码蛋白，通常这类应用可接受“Scar”序列的存在。
  • PIE法构建的无痕环状RNA同样适用于编码蛋白，且相较于有痕环状RNA表现出更高的稳定性和蛋白表达水平。
  • T4连接酶法构建的无痕环状RNA通常在非编码应用场景中更具优势。
• 无痕环状RNA与有痕环状RNA的合成有何区别？

  无痕环状RNA 不含外源序列，免疫原性低更适合体内应用但合成难度大；有痕环状RNA 含有“Scar”序列，合成相对简单，但可能激活免疫系统。

• 金斯瑞环状RNA的独特之处是什么？

  金斯瑞环状RNA采用创新的环化技术和专有的HPLC纯化工艺，确保高水的纯度和环状RNA完整性。

• 金斯瑞能否针对特定应用场景设计IRES序列？

  我们提供多种细胞特异性IRES选项，应用场景涵盖基因疗法和功能研究。

• 与线性mRNA相比，环状RNA有哪些优势？

  相较于常规线性mRNA，环状RNA稳定性更优，具有更持久的蛋白表达，广泛应用于细胞疗法、蛋白替代疗法、疫苗开发、基因编辑、细胞过程调控、免疫调节、生物标志物发现等多个领域。

• 金斯瑞环状RNA合成服务的周期是多久？

  环状RNA合成周期受序列难度和规格大小影响；从基因合成到环状RNA制备完成，快至3周可以交付。

• 环状RNA合成的长度限制是多少？

  环状RNA全长一般应小于5kb，ORF序列通常小于4kb。更多定制需求请咨询技术团队。

• 金斯瑞能否生产无痕环状RNA？

  可以，我们提供基于T4连接酶法构建的非编码型无痕环状RNA，及基于PIE法构建的编码型无痕环状RNA。

• 金斯瑞的环状RNA可以进行修饰吗？

  我们可以提供如5% m6A等修饰。更多定制需求请咨询技术团队。

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询价与订购

• 为了能够准确高效地为您提供报价，请先下载并填写环状RNA服务询价表 ，然后发送至gene@genscript.com.cn我们将尽快为您提供报价。