图1. Protein A ELISA Kit, 2G (GenScript, L01043)检测原理图
Protein A ELISA Kit, 2G(产品编号:L01043) | Protein A ELISA Kit(产品编号:L00430) | |
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线性范围 | 62.5 pg/mL-4000 pg/mL(Mabselect PrismA) | 100 pg/mL-3200 pg/mL(Mabselect SuRe) 50 pg/mL-1600 pg/mL(重组Protein A) |
试剂盒中标准品 | Mabselect PrismA (Cytiva) | Mabselect SuRe (Cytiva)、重组Protein A |
样本处理方式 | 免煮样本:向样本中加入独特的变性液解离Protein A-抗体复合物 | 煮沸样本解离Protein A-抗体复合物 |
检测时间 | 全程≤2 小时,检测孵育时间1小时25分钟 | 全程≤2 小时,孵育时间1小时25分钟 |
适用protein A | 天然Protein A、重组Protein A、耐碱性Protein A |
产品编号 | 名称 | 数量 | 价格 | 操作 |
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L00430
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Protein A ELISA Kit |
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¥5500.00 1 kit |
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L01043
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Protein A ELISA Kit, 2G |
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¥6500.00 96 Tests |
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图1. Protein A ELISA Kit, 2G (GenScript, L01043)检测原理图
图2. L01043试剂盒检测不同类型Protein A的标准曲线
L01043试剂盒可用于检测天然Protein A、普通重组Protein A和耐碱性重组Protein A等数种常见Protein A亲和树脂的配基。检测Protein A范围最低可至50 pg/mL。
表1. L01043试剂盒对不同类型Protein A 的检测范围
Protein A ligand standard | Typical assay working ranges |
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MabSelect PrismA (Cytiva) | 0.0625 – 4 ng/mL |
AT Protein A (Bestchrom) | 0.0625 – 4 ng/mL |
MabSelect SuRe (Cytiva) | 0.1 - 6.4 ng/mL |
UniMab 50HC Protein A (NanoMicro) | 0.2 - 12.8 ng/mL |
MabPurix Protein A (Srpax) | 0.05 - 3.2 ng/mL |
rSPA (Repligen) | 0.1 - 6.4 ng/mL |
图3. L01043试剂盒检测不同浓度IgG样本中的Protein A
高浓度IgG会破坏Protein A与Protein A抗体之间特异性识别,导致回收率显著降低检测结果不准确。L01043检测试剂盒受样本中IgG浓度影响小,在10 mg/mL的IgG样本中回收率可达90%以上。
表2. L01043试剂盒在高浓度IgG 中的Protein A回收率
Protein A (ng/mL) | Spiked to 1 mg/mL human IgG | Spiked to 10 mg/mL human IgG | ||
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Measured (ng/mL) | Recovery Rate | Measured (ng/mL) | Recovery Rate | |
3 | 2.795 | 93% | 2.816 | 94% |
0.5 | 0.463 | 93% | 0.453 | 91% |
0.1875 | 0.184 | 98% | 0.174 | 93% |
图4. L01043试剂盒稀释线性检测
L01043试剂盒检测Protein A结果不受样本稀释因子的影响。
表3. L01043试剂盒检测Protein A浓度在线性稀释前后具有一致性
Sample | Mean N-fold dilution (ng/mL) | Mean 2N-fold dilution (ng/mL) | Mean 4N-fold dilution (ng/mL) | CV |
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Sample A | 0.49 | 0.41 | / | 12.57% |
Sample B | 0.94 | 0.83 | / | 8.79% |
Sample C | 91.25 | 96.25 | 97.6 | 3.52% |
Sample D | 131.92 | 135.63 | 140.73 | 3.25% |
Sample E | 1125.72 | 1190.24 | 1166.47 | 2.81% |
Sample F | 1400.13 | 1458.67 | 1530.93 | 4.48% |
图5. L01043试剂盒日间精密度检测
L01043试剂盒检测Protein A结果不受检测时间影响。
表4. L01043试剂盒检测同一样本不同时间的检测结果具有一致性
Sample | Mean (ng/mL) | CV | ||
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Day 1 | Day 2 | Day 3 | ||
Sample A | 0.45 | 0.56 | 0.53 | 11.08% |
Sample B | 0.88 | 0.92 | 0.78 | 8.39% |
Sample C | 95.03 | 97.26 | 84.12 | 7.63% |
Sample D | 136.09 | 135.53 | 126.42 | 4.09% |
Sample E | 1160.81 | 1116.52 | 1064.91 | 4.31% |
Sample F | 1463.24 | 1486.2 | 1548.44 | 2.94% |
图6. 不同批次L01043检测不同样本中MabSelect PrismA 的浓度
L01043检测试剂盒的批内精确度<10%,批间精确度<15%。
表5. 不同批次的L01043试剂盒检测同一样本结果
MabSelect PrismA (ng/mL) | Intra-assay | Inter-assay | ||
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Mean (ng/mL) | CV | Mean (ng/mL) | CV | |
3 | 2.795 | 3.78% | 2.794 | 4.21% |
0.5 | 0.457 | 4.08% | 0.459 | 4.84% |
0.1875 | 0.173 | 5.75% | 0.179 | 11.41% |
图7. L01043检测不同样本中Protien A的回收率
L01043对不同样本体系中Protein A的回收率稳定在80%~120%。
表6. L01043试剂盒检测不同样本中Protein A的回收率数据
Samples Purified by MabSelect PrismA | Spiked with 1 ng/mL MabSelect PrismA | Spiked with 0.25 ng/mL MabSelect PrismA | ||
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Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL) | Recovery Rate | Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL) | Recovery Rate | |
Sample A | 1.02 | 102% | 0.213 | 85% |
Sample B | 0.887 | 89% | 0.209 | 84% |
Sample C | 0.971 | 97% | 0.236 | 94% |
Sample D | 1.151 | 115% | 0.229 | 92% |
Sample E | 1.047 | 105% | 0.274 | 110% |
Sample F | 1.044 | 104% | 0.298 | 119% |
如果您使用的protein A填料是MabSelect SuRe,我们推荐您使用Protein A ELISA Kit(产品编号:L00430);
如果您使用的protein A填料是MabSelect PrismA,我们推荐您使用Protein A ELISA Kit, 2G(产品编号:L01043);
如果客户端使用的是其他protein A填料,我们推荐优先选择Protein A ELISA Kit, 2G(产品编号:L01043),因为该款试剂盒经过优化,具有更简单的样本处理方式和更优的回收率,且对不同结构的Protein A具有更好的适用性。
Protein A ELISA Kit(产品编号:L00430)提供了两种阳性标准品,分别是重组Protein A标准品(浓度为10 μg/ml)和MabSelect SuRe Protein A标准品(浓度同样为10 μg/ml);
Protein A ELISA Kit, 2G(产品编号:L01043)提供了MabSelect PrismA标准品(浓度为1 μg/ml);
这些标准品用于在实验过程中建立标准曲线,以确保结果的准确性和可重复性。
金斯瑞Protein A ELISA Kit(产品编号:L00430)和Protein A ELISA Kit, 2G(产品编号:L01043)可以识别不同结构的天然Protein A、重组Protein A、耐碱性Protein A。为了更准确的定量样本中残留的Protein A,建议使用与纯化介质中相同的protein A配基作为标准品,并参考试剂盒中描述的方法和法规的要求进行验证。金斯瑞不提供这些额外的标准品,建议从纯化介质供应商购买。
产品编号 | 名称 | 数量 | 价格 | 操作 |
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A01778
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Protein A Antibody, mAb, Mouse |
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¥990.00 40 μg |
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A01779
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Protein A Antibody [Biotin], mAb, Mouse |
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¥990.00 40 μg |
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L00210
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Protein A Resin |
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¥1000.00 |
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L00411
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GST tag ELISA Detection Kit |
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¥2980.00 1 kit (1x96 well) |
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L00433
|
Monofinity A Resin |
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¥4032.00 |
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L00436
|
His Tag ELISA Detection Kit |
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¥2980.00 1 Kit |
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M00091
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Streptavidin-HRP |
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¥890.00 1 mg |
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