小核酸药偶联服务

服务内容

多种偶联方案可选

• AOC：Lys/Cys随机偶联，N端定点偶联等
• POC：无铜点击化学法、铜催化的点击化学法，Michael加成法，及多种双特异性反应基团法（如SMCC、EMCS、SPDP等）。不可降解Linker推荐SMCC，可降解Linker推荐SPDP
• 方案：DAR1偶联产物/随机偶联产物 (DAR＞1)，可选择偶联至核酸任意位置，支持抗体-寡核苷酸、多肽-寡核苷酸、抗体-多肽等多种偶联模式
• Linker：可降解Linker (SPDP、DBCO-Val-Cit-PAB-PNP、MC-Val-Cit-PAB-PNP等)、不可降解Linker (SMCC、EMSC、N3-PEG4-NHS、DBCO-PEG4-NHS等)

请下载小核酸药服务询价单，填写后发送至对应销售经理邮箱或oligo@genscript.com.cn，专业技术支持为您服务。

案例分享

• DAR1偶联方案：经鉴定偶联产物准确，沉默效率高，稳定性好
  

  • 多种检测方案鉴定偶联产物为DAR1

  偶联产物的实际分子量与理论分子量基本一致

  偶联产物在CE-SDS检测中解链成轻链 (LC)，重链(HC)，重链+1个寡核苷酸 (HC+1)，检测所得的峰符合DAR1偶联产物解链后的预期

  DE-Glycosylation Mass spectrometry

  

  CE-SDS

  

  偶联产物在SDS-PAGE检测中解链成轻链 (LC)，重链(HC)，重链+1个寡核苷酸 (HC+1)，检测所得的峰符合DAR1偶联产物解链后的预期

  SDS-PAGE

  

  偶联产物在SEC检测中不解链，分子量越大，峰越靠左

  • AOC产物的分子量大于抗体、寡核苷酸
  • AOC的A260/220位于抗体和寡核苷酸之间

  体积排阻色谱，SEC

  

  • 细胞水平上，DAR1偶联产物沉默效率高

  

  • 小鼠给药后，DAR1偶联产物在血清中浓度更高，稳定性好

  
• 多种偶联方案！支持多种偶联位置/Linker的偶联产物

  多肽可偶联至siRNA的不同链，产物纯度≥90%

  多肽偶联至siRNA反义链

  

  多肽偶联至siRNA正义链

  

  多肽可偶联至寡核苷酸的不同位置

  偶联至寡核苷酸5‘端

  

  偶联至寡核苷酸中间

  

  偶联至寡核苷酸3‘端

  

  不同Linker的偶联产物均表现出显著的基因沉默效率

  • 多种可降解Linker
  • 多种不可降解Linker

  
• 纯度高达99%！提供多元化的高纯度偶联产物

  抗体-寡核苷酸偶联产物，纯度高达99%

  • 寡核苷酸：21nt + 23nt siRNA / 抗体：Cetuximab
  • 聚丙烯酰胺凝胶电泳：AOC偶联产物解链成轻链 (LC)，重链(HC)，重链+1个寡核苷酸 (HC+1)，检测所得的峰符合DAR1偶联产物解链后的预期
  • 琼脂糖凝胶电泳/体积排阻色谱：AOC偶联产物不会解链，AOC偶联产物 (纯化后) 比 Mix 偶联反应后混合物（纯化前），纯度大幅提升

  聚丙烯酰胺凝胶电泳

  

  琼脂糖凝胶电泳

  

  体积排阻色谱，SEC

  

  蛋白-寡核苷酸偶联产物

  • 蛋白：Maltose binding protein (MBP)
  • 寡核苷酸：16nt DNA Oligo

  多肽-寡核苷酸偶联产物，纯度高达99%

  • 多肽：14aa
  • 寡核苷酸：41nt DNA Oligo

  凝胶电泳

  

  HPLC

  

  MS

  

  MS

  
• 精准的基因沉默！偶联产物优越的细胞内化能力和靶向基因沉默效率

  AOC偶联产物表现出优越的细胞内化能力和靶向结合的能力

  • 较之偶联前的抗体，偶联后的AOC细胞内化的能力基本一致，AOC可以高效的进入细胞
  • 较之偶联前的抗体，偶联后的AOC与抗原的结合能力基本一致，AOC表现出较好的靶向结合能力

  

  

  AOC偶联产物表现出精准基因沉默的能力

  • 表达抗体受体蛋白的细胞可以观察到50%的基因沉默效率 ( 左图 )
  • 不表达抗体受体蛋白的细胞未见基因沉默效率 ( 右图 )

  

  

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