慢病毒包装_病毒包装一站式服务

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概览

慢病毒载体（Lentiviral vector）是一种基于人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）改造而成的高效基因递送工具。它具有高效转导分裂及非分裂细胞（如神经元、干细胞）的能力，可将外源基因整合至宿主细胞基因组，实现基因持续表达。凭借其广泛的细胞适用性和稳定的基因递送效率，慢病毒载体在基因治疗、细胞治疗、疫苗开发等领域展现出广阔的应用前景。

金斯瑞采用第三代自失活（SIN）慢病毒系统，提供从载体设计到病毒包装与纯化的一站式服务，加速您的基因与细胞治疗研究。凭借先进的悬浮无血清培养工艺和优化载体pGS-LVV ，我们承诺交付滴度≥ 10⁸TU/mL的慢病毒，确保高效细胞感染。通过自主优化的慢病毒包装平台，实现生产周期显著加快——快至5个工作日即可完成慢病毒包装，为您提供高效优质的慢病毒解决方案。

细胞工程

服务优势

≥ 1E+8 TU/mL
功能滴度保证

实际交付水平
稳定超出承诺标准的3倍

>10 kb大片段基因
滴度提升可达400%

针对大插入片段
定制的高效慢病毒包装平台

100%精准交付
功能滴度

采用Duplex qPCR检测作
为标准质检流程

7个工作日
完成慢病毒包装

14 个自然日
实现基因到病毒全流程

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服务流程

服务详情

规格	推荐应用	保证交付滴度	体积	交付周期	默认质控	交付物
纯化慢病毒	体外培养细胞转导	>1E+8 TU/mL	0.1 mL	7个自然日起	Duplex qPCR / P24 ELISA * 支原体检测转导测试（仅适用于荧光蛋白）无菌检测（内部）	定制慢病毒对照慢病毒^免费聚凝胺（Polybrene）^免费
			1 mL
			5 mL
		>1E+9 TU/mL	1 mL
病毒上清液		>2E+6 TU/mL	0.2 mL	7个自然日起	P24 ELISA 支原体检测	定制慢病毒上清液

*注释：
Duplex qPCR: 可直接检测并定量具有感染能力的病毒颗粒，提供精准的功能性滴度结果。
P24 ELISA: 检测病毒衣壳蛋白，计算出病毒颗粒总数（物理滴度）。依据 P24 滴度公式换算得到的功能性滴度 (TU/mL) 仅为预测值，可能与实际功能性滴度存在差异。

质量控制检查

载体选择指南

应用	载体名称	启动子	药物筛选标记	荧光标记
Gene overexpression	pGS-LVV-EF1a-[ORF]	EF1a	/	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-PuroR	EF1a	PuroR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BSDR	EF1a	BSDR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BleoR	EF1a	BleoR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-HygR	EF1a	HygR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-NeoR	EF1a	NeoR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-EGFP	EF1a	PuroR	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-EGFP	EF1a	BSDR	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-EGFP	EF1a	BleoR	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-EGFP	EF1a	HygR	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-EGFP	EF1a	NeoR	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-mCherry	EF1a	PuroR	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-mCherry	EF1a	BSDR	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-mCherry	EF1a	BleoR	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-mCherry	EF1a	HygR	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-mCherry	EF1a	NeoR	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-BFP	EF1a	PuroR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-BFP	EF1a	BSDR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-BFP	EF1a	BleoR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-BFP	EF1a	HygR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-BFP	EF1a	NeoR	BFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-PuroR	CAG	PuroR	/
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BSDR	CAG	BSDR	/
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BleoR	CAG	BleoR	/
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-HygR	CAG	HygR	/
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-NeoR	CAG	NeoR	/
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-EGFP	CAG	PuroR	EGFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-EGFP	CAG	BSDR	EGFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-EGFP	CAG	BleoR	EGFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-EGFP	CAG	HygR	EGFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-EGFP	CAG	NeoR	EGFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-mCherry	CAG	PuroR	mCherry
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-mCherry	CAG	BSDR	mCherry
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-mCherry	CAG	BleoR	mCherry
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-mCherry	CAG	HygR	mCherry
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-mCherry	CAG	NeoR	mCherry
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-BFP	CAG	PuroR	BFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-BFP	CAG	BSDR	BFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-BFP	CAG	BleoR	BFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-BFP	CAG	HygR	BFP
	pGS-LVV-CAG-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-BFP	CAG	NeoR	BFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-PuroR	CMV	PuroR	/
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BSDR	CMV	BSDR	/
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BleoR	CMV	BleoR	/
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-HygR	CMV	HygR	/
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-NeoR	CMV	NeoR	/
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-EGFP	CMV	PuroR	EGFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-EGFP	CMV	BSDR	EGFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-EGFP	CMV	BleoR	EGFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-EGFP	CMV	HygR	EGFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-EGFP	CMV	NeoR	EGFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-mCherry	CMV	PuroR	mCherry
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-mCherry	CMV	BSDR	mCherry
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-mCherry	CMV	BleoR	mCherry
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-mCherry	CMV	HygR	mCherry
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-mCherry	CMV	NeoR	mCherry
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-BFP	CMV	PuroR	BFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BSDR-P2A-BFP	CMV	BSDR	BFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-BleoR-P2A-BFP	CMV	BleoR	BFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-HygR-P2A-BFP	CMV	HygR	BFP
	pGS-LVV-CMV-[ORF]-hPGK-NeoR-P2A-BFP	CMV	NeoR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-P2A-EGFP	EF1a	/	EGFP
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-T2A-mCherry	EF1a	/	mCherry
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-hPGK-PuroR-P2A-NLS-mCherry	EF1a	PuroR	NLS-mCherry
pGS-LVV-EF1a-Firefly Luciferase-hPGK-PuroR	EF1a	PuroR	/
Inducible expression	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-rtTA-Advanced-hPGK-PuroR	TRE	PuroR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-rtTA-Advanced-hPGK-BSDR	TRE	BSDR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-rtTA-Advanced-hPGK-BleoR	TRE	BleoR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-rtTA-Advanced-hPGK-HygR	TRE	HygR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-rtTA-Advanced-hPGK-NeoR	TRE	NeoR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-tTA-Advanced-hPGK-PuroR	TRE	PuroR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-tTA-Advanced-hPGK-BSDR	TRE	BSDR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-tTA-Advanced-hPGK-BleoR	TRE	BleoR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-tTA-Advanced-hPGK-HygR	TRE	HygR	/
	pGS-LVV-TRE-[ORF]-EFS-tTA-Advanced-hPGK-NeoR	TRE	NeoR	/
CRISPR enigneering	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-PuroR	hU6	PuroR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BSDR	hU6	BSDR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BleoR	hU6	BleoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-HygR	hU6	HygR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-NeoR	hU6	NeoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-PuroR-P2A-EGFP	hU6	PuroR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BSDR-P2A-EGFP	hU6	BSDR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BleoR-P2A-EGFP	hU6	BleoR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-HygR-P2A-EGFP	hU6	HygR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-NeoR-P2A-EGFP	hU6	NeoR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-PuroR-P2A-mCherry	hU6	PuroR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BSDR-P2A-mCherry	hU6	BSDR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BleoR-P2A-mCherry	hU6	BleoR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-HygR-P2A-mCherry	hU6	HygR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-NeoR-P2A-mCherry	hU6	NeoR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-PuroR-P2A-BFP	hU6	PuroR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BSDR-P2A-BFP	hU6	BSDR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-BleoR-P2A-BFP	hU6	BleoR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-HygR-P2A-BFP	hU6	HygR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EF1a-NeoR-P2A-BFP	hU6	NeoR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-PuroR	hU6	PuroR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-BSDR	hU6	BSDR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-BleoR	hU6	BleoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-HygR	hU6	HygR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-NeoR	hU6	NeoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-EGFP	hU6	/	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-mCherry	hU6	/	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-SpCas9-NLS-P2A-BFP	hU6	/	BFP
	pGS-LVV-EF1a-dCas9-KRAB-MeCP2-P2A-PuroR	EF1a	PuroR	/
	pGS-LVV-EF1a-dCas9-KRAB-MeCP2-P2A-BSDR	EF1a	BSDR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-dCas9-KRAB-MeCP2-P2A-PuroR	hU6	PuroR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA]-EFS-dCas9-KRAB-MeCP2-P2A-BSDR	hU6	BSDR	/
	pGS-LVV-EF1a-dCas9-VP64-T2A-PuroR	EF1a	PuroR	/
	pGS-LVV-EF1a-MS2-P65-HSF1-T2A-BSDR	EF1a	BSDR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble sgRNA] MS2 scaffold-hPGK-BleoR	hU6	BleoR	/
shRNA knockdown	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-PuroR	hU6	PuroR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BSDR	hU6	BSDR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BleoR	hU6	BleoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-HygR	hU6	HygR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-NeoR	hU6	NeoR	/
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-PuroR-P2A-EGFP	hU6	PuroR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BSDR-P2A-EGFP	hU6	BSDR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BleoR-P2A-EGFP	hU6	BleoR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-HygR-P2A-EGFP	hU6	HygR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-NeoR-P2A-EGFP	hU6	NeoR	EGFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-PuroR-P2A-mCherry	hU6	PuroR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BSDR-P2A-mCherry	hU6	BSDR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BleoR-P2A-mCherry	hU6	BleoR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-HygR-P2A-mCherry	hU6	HygR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-NeoR-P2A-mCherry	hU6	NeoR	mCherry
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-PuroR-P2A-BFP	hU6	PuroR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BSDR-P2A-BFP	hU6	BSDR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-BleoR-P2A-BFP	hU6	BleoR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-HygR-P2A-BFP	hU6	HygR	BFP
	pGS-LVV-hU6-[scramble shRNA]-EF1a-NeoR-P2A-BFP	hU6	NeoR	BFP
	pGS-LVV-EF1a-Kozak-EGFP-miR-30E(shRNA)-hPGK-PuroR	EF1a	PuroR	/
	pGS-LVV-EF1a-[ORF]-miR-30E(shRNA)-hPGK-PuroR	EF1a	PuroR

案例分享

案例1：转导性能表现

明场	荧光场
		阳性对照 MOI = 2（qPCR 滴度测定）
		样品1 5’ LTR to 3’ LTR: ＞9 kb Duplex qPCR 功能滴度：2.52×10⁸ TU/mL MOI = 1.5（qPCR 滴度测定）
		样品2 5’ LTR to 3’ LTR: ＞9 kb Duplex qPCR 功能滴度： 2.06×10⁸ TU/mL MOI = 1.5（qPCR 滴度测定）

案例2：慢病毒高效转导原代细胞，成功表达抗CD19 CAR

技术难点：原代细胞（例如PBMC）转导难度大，且根据下游应用需求，需要用低 MOI 进行转导，对病毒要求高。

解决方案：利用金斯瑞专利慢病毒包装平台及 pGS-LVV 转运质粒，保证交付高功能滴度慢病毒载体。

慢病毒载体： pGS-LVV-EF1a-CD19CAR-T2A-EGFP

结果：交付功能滴度为 7.07×10⁹ TU/mL 的慢病毒。用慢病毒转导Human PBMC细胞，成功表达抗 CD19 CAR。MOI＝1时，转导效率＞70%。

样品名称	阳性细胞比例 (EGFP+/CD19CAR+)
Non-transduced	0.0%
MOI=1	72.6%
MOI=2	69.0%
MOI=5	73.0%
MOI=10	71.5%

案例3：大插入片段慢病毒制备

挑战：插入片段过大（LTR间>10 kb）会降低慢病毒的包装效率，导致病毒滴度偏低并影响下游实验表现。

解决方案：通过采用金斯瑞自主研发的慢病毒包装系统，我们针对 >6.5 kb 大片段插入 优化了病毒包装流程的各个环节，实现了高滴度的病毒制备。

明场	荧光场
		阳性对照 5’ LTR to 3’ LTR：6,570 bp MOI = 2（qPCR 滴度测定）时间: 转导后48h
		样品1 5’ LTR to 3’ LTR：11,288 bp Duplex qPCR功能滴度：1.03×10⁸ TU/mL MOI = 2（qPCR 滴度测定）时间: 转导后48h

案例4：Cas9和gRNA同时递送实现高效的目标基因敲除, 构建基因敲除的稳定细胞系

技术难点：Cas9和gRNA同时递送，插入序列长，慢病毒包装难度大。靶标细胞转导困难，对慢病毒的滴度要求高。

解决方案：利用金斯瑞专利慢病毒包装平台，保证交付大插入片段高功能滴度慢病毒载体。

结果：交付功能滴度>1×10⁹ TU/mL的Cas9+gRNA慢病毒，成功构建稳定细胞池，基因敲除效率＞90%。

Western Blot检测验证敲除效率
案例5：慢病毒实现12次跨膜蛋白的高效表达

技术难点：多跨膜蛋白由于折叠过程复杂、膜整合难度高，通常难以在细胞表面实现有效表达。

解决方案：采用 pGS-LVV-CAG-T-hPGK-PuroR 包装高效转导的慢病毒载体，在 MOI 为 5 和 10 的条件下高效转导 HEK293T 细胞。

结果：该策略在未进行富集的情况下，慢病毒载体介导的基因转移实现了 T（12 次跨膜）蛋白 100% 的阳性表达，且超过 100 倍。结果表明，病毒递送方式能够实现高效转导，并显著提升难表达多跨膜靶点的表达水平。