ELISA常见问题解答

AAVX Titer Capsid ELISA Kit, Multiple Serotypes

• AAVX Titer Capsid ELISA Kit - Multiple Serotypes可以检测哪些AAV血清型？

  本试剂盒已验证对于AAV 血清型 1、2、5、6、8、9的适用性，典型的工作范围可见下表：

  Serotype	Typical assay working ranges (Capsids/mL)
  AAV1	2.73E+07 - 1.75E+09
  AAV2	1.32E+08 - 7.00E+09
  AAV5	6.30E+07 - 4.00E+09
  AAV6	3.91E+07 - 2.50E+09
  AAV8	6.27E+07 - 4.00E+09
  AAV9	1.09E+08 - 7.00E+09

  注：表中各血清型工作范围验证选择的材料，AAV2为金斯瑞自产的VLP（Virus-like particle），其余均为来自于Progen的Empty capsids。

  本试剂盒中的抗体原料还可识别AAV2.7m8，AAVDJ 和 AAVrh.1，但本试剂盒未对这三种血清型进行验证。对于其他的 AAV 血清型，本试剂盒未进行验证，但并不一定意味着它们无法被检测到。用户可以按照该试剂盒的方案来评估本品对其他血清型的适用性。

• AAVX Titer Capsid ELISA Kit - Multiple Serotypes是否提供阳性标准品？

  本试剂盒中仅提供AAV2标准品，该标准品为金斯瑞自产的VLP（Virus-like particle）。其他血清型的标准品需要用户自行建立。

• 如果没有其他血清型的AAV阳性标准品，是否可以使用AAVX Titer Capsid ELISA Kit - Multiple Serotypes？

  我们建议使用与样品中 AAV 衣壳相匹配的阳性标准品，以生成准确的定量标准曲线。，此试剂盒仅提供 AAV2 的标准品，不包括其他血清型的标准品。

  如果用户无法获取AAV其他血清型标准品，我们提供一种建议的换算方法，可使用试剂盒中的AAV2标准品建立标准曲线并测定样本的浓度，并将测定浓度作为X带入以下公式计算出对应血清型的滴度，表格中的公式我们通过相关性进行了验证。但请注意这种方法仅限粗算研究使用。

  Serotype	Typical assay working ranges (Capsids/mL)
  AAV1	y = 0.2498x - 3E+07
  AAV5	y = 0.8306x - 2E+07
  AAV6	y = 0.3759x - 3E+07
  AAV8	y = 0.5314x - 4E+06
  AAV9	y = 0.4569x + 9E+07

• 一个试剂盒可以检测多少个样本？

  试剂盒中各配有一块预包被的96孔酶标板，其中包含8 孔 x 12 板条，我们建议按照说明书中推荐的标准曲线稀释梯度，配置8个标准品工作液。 为了确保滴度的可靠定量，建议标准品和样品均一式两份进行重复测试。由此可计算出，一旦应用了标准曲线，就可以得到40个重复的测量值。

• 是否可以提供额外的洗液试剂？

  可单独选购 20× Wash Solution (GenScript, B00063)，该洗液适用于本试剂盒。

• 测值超出线性范围是否有效？

  无效。需要调整稀释倍数重新复测。