Ni-IDA亲和层析介质(L00223I)
金斯瑞Ni-IDA亲和层析介质是把IDA(亚氨基二乙酸)共价偶联到4%交联的琼脂糖介质上,再通过IDA的3个结合位点螯合Ni2+制备而成,可以纯化通过包括细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等蛋白表达系统表达的、含有6xHis标签的重组蛋白。该纯化介质用来纯化天然条件下的His标签蛋白,结合在介质上的蛋白用咪唑缓冲液洗脱下来。金斯瑞Ni-IDA亲和层析介质的Ni2+脱落程度很低,并具有高吸附量及高稳定性,在多聚His标签的重组蛋白的纯化实验中有非常好的表现力,具体特性见表1。
表1. Ni-IDA亲层析介质的特性
柱体积
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10ml
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动态吸附量
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20mg 6×His 标签蛋白(27kD)/ml介质
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球形基质
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4%交联度琼脂糖
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平均粒径
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90μm (45-165μm)
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储存溶剂
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1× PBS(含20%乙醇)
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储存&稳定性
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2-8℃储存18个月
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应用实例
下图为金斯瑞和X公司Ni-IDA亲和层析介质的比较

图1. 分别使用金斯瑞和X公司的Ni-IDA亲和层析介质纯化含His标签的30 kD可溶性重组蛋白样品,该蛋白样品来自于E.coli细胞裂解液。
泳道1:上样流出液(X公司) | 泳道5:上样流出液(金斯瑞) |
泳道2:洗涤流出液(X公司) | 泳道6:洗涤流出液(金斯瑞) |
泳道3:洗脱流出液(X公司) | 泳道7:洗脱流出液(金斯瑞) |
泳道4:残留物(X公司) | 泳道8:残留物(金斯瑞) |
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