荧光多肽合成

荧光标记或荧光探针是众多成像和诊断应用的理想选择。荧光多肽的应用范围包括肽与蛋白质相互作用研究、酶活性测定或新疾病模型的开发。荧光团可以共价连接到N端或C端,但建议与N端连接。由受体和猝灭剂组成的FRET对可以在内部或外部连接。对于较长的序列,建议在内部连接FRET对。

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  • 应用

  • 案例研究

多肽荧光修饰

金斯瑞提供了大量的多肽荧光标记,且种类还在不断增加。下方列出了一些我们最常用的修饰:

名称 激发波长(nm) 发射波长(nm) 发射颜色 应用领域
7-甲氧基香豆素-4-乙酸 328 393 蓝色 体外成像
亚细胞定位
共聚焦显微镜
流式细胞术
FITC-Ahx 494 521 绿色
FAM 495 520 绿色
Cy3 555 570 黄色
5-羧基四甲基罗丹明(TMR) 542 568 橙色
Cy5 646 662 红色
Cy5.5 673 707 近红外 体外成像
亚细胞定位
体内光学成像
血管造影术
Cy7 750 773 近红外

FRET对

荧光共振能量转移(FRET)是一种描述两种荧光团之间能量转移的机制。由于FRET效率部分取决于供体分子和受体分子之间的距离,因此该技术通常用于研究酶的效率、蛋白质与蛋白质之间相互作用或其他分子动力学(图1)。

FRET pairs

图1. 用于蛋白酶研究的FRET机制。当肽保持完整时,受体分子将淬灭供体分子,检测不到荧光。如果肽序列被蛋白酶活性裂解,受体将不再淬灭供体,从而检测到荧光信号。

以下是最常用的FRET对:

供体 受体
名称 激发波长(nm) 发射波长(nm) 名称 激发波长(nm) 发射波长(nm)
Cy2 490 510 Cy3 555 570
FITC 494 521 TRITC 557 576
FAM 495 520 Cy3 555 570
FAM 495 520 德克萨斯红 589 615
FAM 495 520 Cy5 646 662
Cy3 555 570 Cy5 646 662
EDANS 335 493 DABCYL 453 -
Glu(EDANS)-NH2 335 493 DABCYL 453 -
MCA 328 393 DNP 348 -
Abz 330 420 DNP 348 -
Abz 330 420 Tyr (3-NO2) 360 -

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