您的位置: 生物医药CRO » 分子生物学 » DNA测序服务 » 3730测序仪简介

3730测序仪简介

3730测序仪技术特点：

Applied Biosystems推出的3730系列，代表了进行高通量、高质量测序和片段分析的新一代平台，3730整合了自动化装置和光学技术的最新进展，同样应用Applied Biosystems优化的试剂和专门的软件系统，可以完全满足实验者日益增加的通量需求和质量需求，为您提供全面的测序服务。

如果您提供纯化好的PCR产物，条带必须单一，纯度OD₂₆₀/OD₂₈₀=1.6~2.0。最好溶解在灭过菌的去离子水中，浓度要求>50 ng/μl，提供10μl以上。同时请您提供PCR引物，并注明浓度，一定要提供经PAGE纯化的引物，浓度大于5pmol/μl。

PCR产物直接测序成功的关键是PCR产物的纯度，所以我们提倡切胶回收PCR产物。如果有几条PCR产物长度相近，用电泳胶也无法分开，此时的PCR产物便无法直接测序。这种情况建议把PCR产物克隆后测序。
PCR产物直接测序成功的另一要因是引物，不能做PCR反应的引物便能测序。测序用引物要求较高，引物的3’端必须与模板完全其配，含有Mix碱基的引物一般不能测序（特别是3’端）。此外，测序引物长度一般为20个碱基左右，GC含量必须在50~60%左右。而且用于测序的引物一定要经过PAGE纯化，纯度必须大于90%。
在PCR扩增时，难以扩增（扩增后的PCR带较弱）的PCR产物在测序时一般成功率较低。
小于150bp的PCR产物直接测序效果不好，建议克隆后测序。

注：以下电泳图片均为2微升上样量。

请提供纯化后的Cosmid DNA大于5μg（因每个反应的用量需1μg以上）。DNA必须注明浓度，并请提供浓度（浓度必须正确）大于5pmol/μl的引物10μl以上。

客户在提供测序样品的同时，请注明用何种引物，测几个反应，是否测通，是单链测序还是双链测序等。