| 项目 |
备注 |
| 动物 |
10只Balb/c小鼠或6只大鼠 |
| 弗氏佐剂 |
加弗氏完全佐剂进行初免，然后除终免外都加弗氏不完全佐剂进行免疫 |
| 免疫原 |
客户提供10mg或10mg以上纯化抗体。胃蛋白酶消化目标抗体，生产高纯度的F(ab')2片段作为免疫原，筛选杂交瘤细胞 |
| 免疫 |
免疫原用无菌盐水稀释并与佐剂混合，腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液，在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫 |
| 周期 |
第1天 |
采血0.2ml（获得0.1ml免疫前血清）
第一次免疫（抗原加弗氏完全佐剂） |
| 第14天 |
第二次免疫（抗原加弗氏不完全佐剂） |
| 第21天 |
采血和ELISA检测 |
| 第28天 |
第三次免疫（抗原加弗氏不完全佐剂） |
| 第35天 |
采血和ELISA检测 |
| 第42天 |
第四次免疫（抗原溶于PBS或盐水） |
| 第47天 |
细胞融合 |
| 细胞融合 |
采集血清样品，用目标抗体和无关的阴性对照抗体分别进行ELISA检测。用显示出预期免疫应答的小鼠进行细胞融合 |
| 扩增及筛选 |
96孔板培养融合细胞，用目标抗体和无关的阴性抗体进行ELISA检测，筛选阳性克隆，转入24孔板培养并鉴定亚类 |
| 亚克隆 |
阳性克隆用有限稀释法亚克隆至形成稳定的单克隆杂交瘤细胞。每个母细胞的两个亚克隆细胞株用培养瓶扩增，每个亚克隆细胞株冻存4~6支 |
| 鉴定 |
对阳性培养上清中获得的抗体进行亚类，相关反应性，特异性，抗原中和反应性和抗体配对等鉴定 |
| 交付 |
交付包括2瓶冻存的细胞或者每克隆提供1瓶活细胞及5ml培养上清 |
